細(xì)胞傳代方法

一、細(xì)胞解凍方法：準(zhǔn)備一個培養(yǎng)培養(yǎng)瓶，使其包含產(chǎn)品說明書中列出的推薦體積的適當(dāng)培養(yǎng)基，并針對溫度和pH(CO2)進(jìn)行平衡。在37°C或該細(xì)胞系的正常生長溫度下，在水浴中輕輕攪拌解凍小瓶。解凍應(yīng)該很快，大約2分鐘或直到冰晶融化。從水浴中取出小瓶，并通過浸入或噴灑70%乙醇來凈化。在層流組織培養(yǎng)罩中遵循嚴(yán)格的無菌條件進(jìn)行所有進(jìn)一步操作。擰下小瓶的頂部并將內(nèi)容物轉(zhuǎn)移到含有9mL推薦培養(yǎng)基的無菌離心管中。通過溫和離心（125×g10分鐘）去除冷凍保護(hù)劑(DMSO)。丟棄上清液，將細(xì)胞...

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3T3-L細(xì)胞誘導(dǎo)分化操作步驟

3T3-L細(xì)胞誘導(dǎo)分化操作步驟3T3-L1(小鼠胚胎成纖維細(xì)胞)是從3T3細(xì)胞（Swissalbino）中經(jīng)克隆分離得到的連續(xù)傳代的亞系。該細(xì)胞從快速分裂到匯合和接觸性抑制狀態(tài)經(jīng)歷了前脂肪細(xì)胞到脂肪樣細(xì)胞的轉(zhuǎn)變。該細(xì)胞鼠痘病毒陰性；可產(chǎn)生甘油三酯，高濃度血清可增強(qiáng)細(xì)胞內(nèi)脂肪堆積?？捎糜谘芯刻悄虿?，肥胖癥等。細(xì)胞名稱：小鼠胚胎成纖維(經(jīng)成脂分化驗(yàn)證)細(xì)胞簡稱：3T3-L1產(chǎn)品貨號：TCM-C702種屬來源：小鼠組織來源：胚胎細(xì)胞形態(tài)：成纖維細(xì)胞樣生長特性：貼壁生長培養(yǎng)體系：DM...

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分光光度計的分類及工作原理

分光光度計是一種廣泛應(yīng)用于科學(xué)、醫(yī)藥、化工等領(lǐng)域的儀器設(shè)備，其主要功能是對各種物質(zhì)溶液的組成和濃度進(jìn)行光學(xué)分析。在科學(xué)研究、藥物研發(fā)、化學(xué)品生產(chǎn)等領(lǐng)域中，分光光度計都占據(jù)著十分重要的地位。分光光度計的種類眾多，不同類型的分光光度計在不同領(lǐng)域和實(shí)驗(yàn)中都有著重要的應(yīng)用。那么，什么是分光光度計？其分類和工作原理為何？下面我們來詳細(xì)探討一下。一、分光光度計的分類1.根據(jù)使用的光源，分光光度計可以分為以下兩類：單色儀：使用單色源，通過精密的頻率選通系統(tǒng)選擇特定光譜范圍的波長。連續(xù)光源儀...

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SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳實(shí)驗(yàn)步驟

SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳原理：SDS-聚丙烯酰胺凝膠電泳，是在聚丙烯酰胺凝膠系統(tǒng)中引進(jìn)SDS（十二烷基硫酸鈉），SDS會與變性的多肽，并使蛋白帶負(fù)電荷，由于多肽結(jié)合SDS的量幾乎總是與多肽的分子量成正比而與其序列無關(guān)，因此SDS多肽復(fù)合物在丙稀酰胺凝膠電泳中的遷移率只與多肽的大小有關(guān)，在達(dá)到飽和的狀態(tài)下，每克多肽可與1.4g去污劑結(jié)合。當(dāng)分子量在15KD到200KD之間時，蛋白質(zhì)的遷移率和分子量的對數(shù)呈線性關(guān)系，符合下式：logMW=K-bX，式中：MW為分子量，X為遷移率...

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蛋白質(zhì)電泳常用試劑配制方法

蛋白質(zhì)電泳常用試劑配制方法如下：一、3×SDS-PAGEloadingbuffer的配制3×SDS-PAGEloadingbuffer10ml1MTris-Hcl(PH6.8)1.5mlSDS0.6gBPB(溴酚藍(lán))30mg甘油（丙三醇）3ml去離子水5.5ml1、將除BPB以外的藥品溶解。SDS常溫下很難溶解，可以在37℃水浴溶解。溶解后，再加入BPB，進(jìn)行溶解；2、把溶好的buffer分裝到1.5ml的離心管中，1ml/管，常溫放置；3、使用前，每管加入30µ...

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